紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)是利用物質(zhì)的分子或離子對(duì)某一波長(zhǎng)范圍的光吸收作用,對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性分析,定量分析及結(jié)構(gòu)分析,所依據(jù)的光譜是分子或離子吸收入射光中特定波長(zhǎng)的光而產(chǎn)生的吸收光譜。
紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的工作原理:
1、基本工作原理和紅外光譜儀相似,利用一定頻率的紫外可見(jiàn)光照射被分析的有機(jī)物質(zhì),引起分子中價(jià)電子的躍遷,它將有選擇地被吸收。一組吸收隨波長(zhǎng)而變化的光譜,反映了試樣的特征。
2、紫外可見(jiàn)光的范圍內(nèi),對(duì)于一個(gè)特定的波長(zhǎng),吸收的程度正比于試樣中該成分的濃度,因此測(cè)量光譜可以進(jìn)行定性分析,而且根據(jù)吸收與已知濃度的標(biāo)樣的比較,還能進(jìn)行定量分析。
功能:
1、光度測(cè)量:可同時(shí)測(cè)量1~6個(gè)波長(zhǎng)處的透過(guò)率和吸光度。
2、光譜測(cè)量:在波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行透過(guò)率、吸光度和能量的圖譜掃描,并可進(jìn)行各種數(shù)據(jù)處理如峰谷檢測(cè)、導(dǎo)數(shù)運(yùn)算、譜圖運(yùn)算等。
3、定量測(cè)量:?jiǎn)尾ㄩL(zhǎng)、雙波長(zhǎng)、三波長(zhǎng)和多波長(zhǎng)測(cè)定。1~9點(diǎn)工作曲線(xiàn)回歸。
4、動(dòng)力學(xué)測(cè)定:在任意設(shè)定的波長(zhǎng)處進(jìn)行透過(guò)率和吸光度的時(shí)間掃描并可進(jìn)行各種數(shù)據(jù)運(yùn)算。
5、數(shù)據(jù)輸出:可進(jìn)行數(shù)據(jù)文件和參數(shù)文件的存取,測(cè)量結(jié)果以標(biāo)準(zhǔn)通用的數(shù)據(jù)文件格式輸出。
關(guān)于紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的檢查與校正:
日常在使用時(shí),是否要經(jīng)常進(jìn)行儀器波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的檢查?答案是否定的。當(dāng)在日常測(cè)定中發(fā)現(xiàn)儀器測(cè)定靈敏度下降,這時(shí)才應(yīng)進(jìn)行波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的檢查,簡(jiǎn)易的檢查方法(粗檢)是:儀器開(kāi)機(jī)后,調(diào)節(jié)波長(zhǎng),在吸收池座的通光道中插入一張白色卡片紙,若能觀(guān)察到一長(zhǎng)方形的黃色光斑,說(shuō)明波長(zhǎng)準(zhǔn)確度屬正常范圍,否則就應(yīng)進(jìn)行波長(zhǎng)校正。
當(dāng)儀器經(jīng)過(guò)長(zhǎng)途搬運(yùn)、受過(guò)機(jī)械振動(dòng)或更換光源燈泡后,必須進(jìn)行波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的檢查與校正。粗檢同上,其校正方法有:干涉濾光片或鐠釹濾光片校正法、利用氘燈的特征發(fā)射線(xiàn)校正法。