752分光光度計(jì)工作原理與紅外光譜、拉曼光譜的工作原理近似，采用一定頻率的紫外可見(jiàn)光照射所需檢測(cè)的物質(zhì)，引起物質(zhì)中電子躍遷，從而表現(xiàn)出隨著吸收波長(zhǎng)變化而引起的光譜變化，記錄光譜變化形成分析數(shù)據(jù)。
752分光光度計(jì)可見(jiàn)光因波長(zhǎng)不同呈現(xiàn)不同顏色，這些波長(zhǎng)在一定范圍內(nèi)呈現(xiàn)不同顏色的光稱(chēng)單色光。太陽(yáng)或鎢絲等發(fā)出的白光是復(fù)合光，是各種單色光的混合光。利用棱鏡可將白光分成按波長(zhǎng)順序排列的各種單色光，即紅、橙、黃、綠、青、藍(lán)、紫等，這就是光譜。有色物質(zhì)溶液可選擇性地吸收一部分可見(jiàn)光的能量而呈現(xiàn)不同顏色，而某些無(wú)色物質(zhì)能特征性地選擇紫外光或紅外光的能量。物質(zhì)吸收由光源發(fā)出的某些波長(zhǎng)的光可形成吸收光譜，由于物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)不同，對(duì)光的吸收能力不同，因此每種物質(zhì)都有特定的吸收光譜，而且在一定條件下其吸收程度與該物質(zhì)的濃度成正比，分光光度法就是利用物質(zhì)的這種吸收特征對(duì)不同物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析的方法。
752分光光度計(jì)的使用注意事項(xiàng)：
1)選用儀器的狹縫寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度，否則測(cè)得的吸收度值會(huì)偏低，狹縫寬度的選擇應(yīng)以減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn)，對(duì)于大部分被測(cè)品種，可以使用2nm縫寬。
2)在開(kāi)機(jī)前將樣品室內(nèi)的干燥劑取出，儀器自檢過(guò)程中禁止打開(kāi)樣品室蓋。
3)吸收池必須潔凈，并注意配對(duì)使用。量瓶、移液吸管均應(yīng)校正、洗凈后使用。比色皿內(nèi)溶液以皿高不可過(guò)滿(mǎn)以防液體溢出腐蝕儀器。測(cè)定時(shí)應(yīng)保持比色皿清潔，池壁上液滴應(yīng)用擦鏡紙擦干，切勿用手捏透光面。測(cè)定紫外波長(zhǎng)時(shí)，需選用石英比色皿。吸收池放入樣品室時(shí)應(yīng)注意方向相同。用后用溶劑或水沖洗干凈，晾干防塵保存。
4)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后將比色皿中的溶液倒盡，然后用蒸餾水或有機(jī)溶劑沖洗比色皿至干凈，倒立晾干。關(guān)電源將干燥劑放入樣品室內(nèi)，蓋上防塵罩，做好使用登記。
5)測(cè)試品標(biāo)注測(cè)試物質(zhì)以及配置濃度。測(cè)試中，因采用測(cè)試品溶劑為空白對(duì)照：由儀器規(guī)定波長(zhǎng)或者規(guī)定的吸收峰自動(dòng)掃描測(cè)定，測(cè)吸收度以核對(duì)測(cè)試品吸收峰位置是否正確。
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